Sterilizációs hatékonysági ellenőrzés az autoklávok

A mikrobiológiai laboratórium egyik legfontosabb eszköze a sterilizáló, az autokláv (nagynyomású gőz sterilizáló) a leggyakrabban használt. A GB 4789.1-2016 szerint a laboratóriumi berendezéseket rendszeresen ellenőrizni és/vagy kalibrálni kell (ellenőrző címkékkel), karbantartani és kiszolgálni a megfelelő teljesítmény és működési biztonság biztosítása érdekében. De vajon az autoklávja ilyen ellenőrzéseken ment keresztül? És ha ellenőrzést szeretne végezni, hogyan kell ezt megtenni? Ma összefoglaljuk az autoklávok sterilizációs hatékonyságának ellenőrzésének kulcsfontosságú módszereit.

Az autokláv sterilizálás hatékonyságának ellenőrzése általában olyan módszereket tartalmaz, mint a kémiai indikátor, a maximális hőmérő, az önkészítésű hőmérséklet-cső és a biológiai indikátor. Noha ezeknek a módszereknek hasonló alapelvei vannak - elsősorban annak megerősítésével, hogy a sterilizáló eléri -e a szükséges hőmérsékletet a sterilizálás során - választhat egy vagy többet a laboratórium sajátos feltételei alapján.

1. Kémiai indikátor módszer

Alapelv: A kémiai mutatók szín- vagy alakváltozáson mennek keresztül meghatározott hőmérsékleti és időviszonyok mellett. Ezt a változást arra használják, hogy meghatározzuk, hogy a sterilizációs paraméterek teljesültek -e.

A laboratóriumokban általában használt elem a 3M autokláv jelző szalag, amely megváltoztatja a színt a sterilizálás után. A szalag hőérzékeny vegyi anyagokból, színfejlesztőkből és festékanyagokból készül, csíkmintázatban nyomtatva ragasztószalagra. Közvetlenül a sterilizációs csomag külső oldalára alkalmazzák, legalább 5 cm hosszúsággal. Nyomja meg a szalagot enyhén, hogy biztosítsa a jó tapadást és a tömítést. Miután 121 ° C -nak 20 percig vagy 130 ° C -ot tett ki 4 percig, a szalag átlós fehér csíkjainak teljesen feketévé kell válniuk. Ha a színváltozás egyenetlen vagy hiányos, a csomagot nem tekintik megfelelően sterilizáltnak.

2. Maximális hőmérő módszer

Alapelv: Ez a módszer olyan higany -hőmérőt használ, amely melegítés után nem tér vissza alacsonyabb hőmérsékletre, hasonlóan a hagyományos orvosi hőmérőhez. Ez jelzi a sterilizálás során elért maximális hőmérsékletet.

Az ellenőrzéshez helyezze a higany hőmérőt egy vízzel töltött Erlenmeyer-lombikba. A sterilizálás során helyezze a lombikot az autokláv felső és alsó szakaszaira. A folyamat után ellenőrizze, hogy a hőmérő leolvasása megfelel -e a szükséges hőmérsékletnek. Ez a módszer csak a hőmérsékletet tudja ellenőrizni, és nem tudja megerősíteni, hogy a sterilizálási időigény teljesült -e, tehát az autokláv ellenőrzésének minimális szabványát képviseli.

3. Saját készítésű hőmérsékleti cső módszer

Alapelv: Ez a módszer bizonyos vegyi anyagokat használ, amelyek meghatározott hőmérsékleten megolvadnak és átkristályosodnak, megkülönböztető kristályformákkal a hűtés után. Ezeket a vegyi anyagokat kis üvegcsövekben lezárják és az autoklávba helyezik. A sterilizálás után megvizsgáljuk a kristály alakját annak meghatározására, hogy elérik -e a megfelelő hőmérsékletet.

A benzoesavat általában használják, 121–123 ° C olvadási ponttal, amely igazodik az autokláv standard sterilizációs hőmérsékletéhez. A szilárd benzoesavat kis üvegcsövekben lezárják és az autoklávba helyezik. A sterilizálás után megfigyeljük a benzoesav állapotát, hogy megerősítse a célhőmérsékletet. A maximális hőmérő módszerhez hasonlóan ez a megközelítés csak a hőmérsékletet, nem pedig a sterilizálás időtartamát igazolja.

4. Biológiai indikátor módszer

Alapelv: Ez a módszer a Geobacillus sztearotermophilus nem patogén spóráit használja indikátor organizmusokként a termikus sterilizálás hatékonyságának felmérésére. Ezek a spórák nagyon hőállóak, a rezisztencia hasonló a patogén Clostridium botulinum spórákhoz, így megfelelő indikátorok a sterilizációs hatékonyság igazolására.

A biológiai mutatók három formában érhetők el: spóra-szuszpenziók, spóraszalagok és integrált spóra-közepes csövek. Ezeket általában a sterilizáló tartály öt helyén helyezik el: az alsó réteg elülső, középső és hátulja, valamint a felső és a középső rétegek középpontja. A sterilizálás után a mutatókat a brómokrezol lila-glükóz-pepton vízbe oltják be, és 2–7 napig 55–60 ° C-on inkubálják. Ha a közeg tiszta és változatlan színű marad, a spórákat megölték, jelezve a jó sterilizálást. Ha a közeg sárga és zavarossá válik, a spórák túléltek, ami a rossz sterilizációs teljesítményre utal. Mind a spóra felfüggesztése, mind a spóraszalag ugyanazt az érvényesítési folyamatot követi.

A kereskedelmi biológiai indikátorcsöveket általában a laboratóriumokban is használják. Ezek tartalmazzák a Geobacillus stearothermophilus spórákat és egy lezárt üveg ampoulát, amelynek növekedési közege van. A csöveket a sterilizáló tartály egészében helyezzük el. Az autoklávozás után az üveg ampoulát összetörik, hogy felszabadítsák a tápközeget, és a csövet 56 ° C -on inkubálják, a pozitív kontroll mellett. Ha a sterilizáció nem megfelelő, akkor a túlélő spórák növekednek, és a húslevest sárgára fordítják. Ha a sterilizálás hatékony, akkor a spórákat inaktiválják, és a húsleves lila marad.

Igazolási gyakoriság

Jelenleg nincs szigorú nemzeti szabvány az autokláv hatékonyságának ellenőrzésének gyakoriságára. A laboratóriumoktól elvárják, hogy meghatározzák saját ellenőrzési ütemterveiket, és szigorúan betartják őket. Figyelembe véve az eredmények könnyű használatát és megbízhatóságát, azt javasoljuk, hogy használja a jelzőszalagot a biológiai indikátorcsövekkel kombinálva, mivel ezek egyszerű működést és a sterilizációs hatékonyság átfogó ellenőrzését kínálják.

Megjegyzések a sterilizálásról (néhány behozott teljesen automatikus autoklávhoz nem szükséges)
Nagynyomású gőz sterilizátor használatakor alapvető fontosságú, hogy a gőz felszabadulásakor a kamrában lévő összes hideg levegőt kiürítse. Csak a hideg levegőt eltávolítás után, ha a kipufogószelepet bezárják. Ha valamelyik levegő megmarad, a nyomásmérő jelzi a helyes nyomást, de a kamrán belüli tényleges hőmérséklet elmarad. Minél több a levegő, annál nagyobb a nyomás és a hőmérséklet közötti eltérés, ami potenciálisan hiányos sterilizálást eredményez. (Ezt gyakran megfigyelik a fermentációs közeg sterilizálása során, ahol a légbuborékok kis vezetőcsövekben maradnak - alaposan kimerítve a hideg levegőt.)