Autokláv sterilizációs hatás ellenőrzése

A mikrobiológiai laboratórium egyik alapvető laboratóriumi eszköze a sterilizáló, az autoklávok a leggyakrabban használt típus. A GB 4789.1-2016 szerint a laboratóriumi berendezéseket rendszeresen ellenőrizni és/vagy kalibrálni kell (megfelelő címkézéssel), karbantartani és kiszolgálni az operatív teljesítmény és biztonság biztosítása érdekében. De vajon a sterilizálója hasonló ellenőrzéseken megy keresztül? Ha ilyen érvényesítésre van szükség, hogyan kell azt elvégezni?

Ma összefoglaljuk az autoklávok sterilizációs hatékonyságának érvényesítésének legfontosabb szempontjait.

Az autokláv sterilizációs hatékonyság validálásának általános módszerei közé tartozik a kémiai indikátor módszer, a rögzített pontmérő módszer, az önkészítésű hőmérsékleti szonda módszer és a biológiai indikátor módszer. Az ezen módszerek mögött álló alapelvek hasonlóak, elsősorban arra összpontosítva, hogy ellenőrizze, hogy a sterilizáló hőmérséklet eléri -e a szükséges szintet a sterilizálás során. A laboratórium konkrét feltételeitől függően egy vagy több módszert lehet kiválasztani az érvényesítéshez.

1. Kémiai indikátor módszer
Alapelv: A kémiai mutatók színváltozáson vagy deformáción mennek keresztül, ha egy meghatározott hőmérsékletnek és időtartamnak vannak kitéve, lehetővé téve a sterilizációs paraméterek teljesülésének értékelését.

A laboratóriumokban általánosan használt mutató a 3M autokláv jelző szalag, amely megváltoztatja a színt a sterilizálás előtt és után, hogy jelezze a hatékonyságot. Ez a szalag hőérzékeny vegyi anyagokkal és színfejlesztő szerekkel készül, amelyek egy speciális ragasztószalagon csíkokban nyomtattak. A szalagot a csomag külső oldalára kell alkalmazni, legalább 5 cm hosszúsággal, és határozottan megnyomja a jobb tapadást és a tömítést. A 121 ° C -on történő sterilizálás után 20 percig vagy 130 ° C -on 4 percig, a szalag átlós fehér csíkjai teljesen feketévé válnak. Ha a színváltozás egyenetlen vagy hiányos, akkor a csomag nem teljesítette a sterilizálási feltételeket.

2. rögzített pont hőmérő módszer
Alapelv: Ez a módszer olyan higany -hőmérőt használ, amely megtartja a legmagasabb hőmérsékletet, hasonlóan a hagyományos klinikai hőmérőhez. Segít meghatározni az autoklávban elért maximális hőmérsékletet a sterilizálás során.

Az validáláshoz higanyhőmérőt helyeznek el egy vízzel töltött nagy kúpos lombik belsejébe. A sterilizálás során a lombikot az autokláv felső és alsó szakaszán mind az alsó részén helyezik el. A sterilizálás után a hőmérő leolvasását a szükséges hőmérsékleten ellenőrzik. Ez a módszer azonban csak igazolja a hőmérsékletet, és nem erősíti meg, hogy a sterilizációs időtartam elegendő -e, így az autokláv validálásának legalapvetőbb standardja.

3. Saját készítésű hőmérsékleti szonda módszer
Alapelv: Ez a módszer kihasználja egyes vegyi anyagok olvadási és átkristályosodási jellemzőit, ha hőnek vannak kitéve. Ha ezeket a vegyi anyagokat a kis üvegcsövekben lezárja, és az autoklávba helyezi, a sterilizálás utáni kristályképződés megmutathatja, hogy elérik -e a szükséges hőmérsékletet.

Egy általánosan használt reagens a benzoesav, amelynek olvadáspontja 121–123 ° C, szorosan megegyezik a szükséges sterilizációs hőmérséklethez. A sterilizálás során a szilárd benzoesavat egy kis üvegcsőbe lezárják és az autoklávba helyezik. A folyamat után megvizsgáljuk a benzoesav kristályszerkezetét, hogy meghatározzuk, hogy a szükséges hőmérsékletet sikerült -e elérni.

A rögzített pontmérő módszerhez hasonlóan ez a megközelítés csak a hőmérsékletet jelzi, és nem tudja megerősíteni, hogy a sterilizációs időtartam elegendő-e.

4. Biológiai indikátor módszer
Alapelv: Ez a módszer nem patogén Geobacillus sztearotermophilus spórákat használ, mint indikációs organizmusokat a hő sterilizálás hatékonyságának felmérésére. Ezek a spórák nagyon rezisztensek a hővel, és hőkezelőségük hasonló a Clostridium botulinum spórákhoz, így megbízható referenciaként szolgálnak annak értékeléséhez, hogy az autokláv megfelel -e a sterilizációs követelményeknek.

A biológiai mutatók három formában érkeznek:

Spóra felfüggesztések
Spóracsíkok
A spóraszalagok tenyésztő tápközeggel kombinálva (biológiai indikátorcsövek)
A biológiai mutatókat általában öt helyen helyezik el a sterilizáló kamrában:

Alsó szint: elülső, középső és hátul
Felső szint: Központ
A sterilizálás után a mutatókat a brómokrezol lila-glükóz-peptonvízbe oltják be, és 55–60 ° C-on inkubálták 2–7 napig:

Ha a tápközeg tiszta és változatlan marad, a spórák megölték, jelezve a hatékony sterilizációt.
Ha a közepes sárga és zavarossá válik, a spórák túléltek, azaz a sterilizálási folyamat nem volt hatékony.
Ugyanez az érvényesítési módszer vonatkozik mind a spóra -szuszpenziókra, mind a spóracsíkokra.

Számos laboratórium kereskedelmi biológiai indikátorcsöveket is használ, amelyek hasonlóan működnek a spóra -szuszpenziókhoz és csíkokhoz. Ezek a csövek G. stearothermophilus spórákat tartalmaznak, valamint a tápközeg üveg ampoulát. Az autoklávozás után a cső belsejében lévő üveg ampoulát összetörik, hogy felszabadítsuk a tápközeget, és a csövet 56 ° C -on inkubáljuk, pozitív vezérléssel.

Ha a sterilizáció nem volt hatékony, akkor az életképes spórák növekednek, és a húslevest sárgá fordítják.
Ha a sterilizáció sikeres volt, a spórák inaktiválódnak, és a húsleves lila marad.
Az autokláv validálás gyakorisága
Jelenleg nincs szigorú szabályozási szabvány, amely meghatározza, hogy az autoklávokat milyen gyakran kell érvényesíteni. A laboratóriumoknak azonban meg kell határozniuk a saját érvényesítési ütemtervüket, és szigorúan betartaniuk kell azt.

A működés megkönnyítése és a megbízható validálás érdekében a kémiai indikátor szalag és a biológiai indikátorcsövek nagyon ajánlottak. Ezek a módszerek felhasználóbarátak, és átfogó értékelést nyújtanak a sterilizálás hatékonyságáról.

Az autoklúra kulcsfontosságú megfontolásai
(Néhány, teljesen automatizált importált autoklávok nem igényelnek kézi szellőztetést)

Autokláv használatakor elengedhetetlen a hideg levegőt eltávolítani a kamrából, miközben gőzt vezet. A kipufogó szellőzőnyílásnak nyitva kell maradnia, amíg az összes hideg levegő kiürül, biztosítva az egyenletes hőmérsékleti eloszlást.

Ha bármelyik levegő marad a kamrában, a nyomásmérő jelzi a helyes nyomást, de a tényleges hőmérséklet a vártnál alacsonyabb lesz. Minél több maradék levegő, annál nagyobb az eltérés, ami hiányos sterilizációhoz vezet.

(Azok számára, akik kis csövekben légbuborékokkal találkoznak, amikor a fermentáció-alapú közeg sterilizálják, próbálja meg növelni a levegő evakuálását az eredmények javítása érdekében.)